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更新日期2025-03-11 14:13
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細(xì)胞凍存液適用于凍存各種動物及人的細(xì)胞系和原代細(xì)胞。產(chǎn)品優(yōu)勢:
不含血清、無蛋白,減少病毒、霉菌和支原體等的污染;
化學(xué)成分明確,主要成分符合藥典標(biāo)準(zhǔn);
無批次差異,細(xì)胞復(fù)蘇存活率高;
完全凍存液配方,可直接使用,方便簡捷;
無需程序降溫,可-80℃冰箱/液氮保存;
可原位凍存,比如雜交瘤細(xì)胞的亞克隆,可以減少工作量。
細(xì)胞凍存液凍存及復(fù)蘇方式
凍存方式:
選擇凍存處于對數(shù)生長期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。
1、按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于試管中。
2、按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計算所需凍存細(xì)胞數(shù)。(參考:5×105至5×106 cells/ml)。
3、取相當(dāng)于所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液量,置于離心管中,離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,4℃,3~5 min)。移去離心管中的上清液。
4、加入適量無血清細(xì)胞凍存液于離心管中,使細(xì)胞濃度為5×105至5×106 cells/ml。緩慢混合均勻,制成細(xì)胞混合液。
5、將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示的冷凍保存管中。
6、直接將含細(xì)胞懸液的凍存管放入-80℃冰箱,冷凍保存。
7、若研究者需要液氮保存時,可先放入-80℃冰箱過夜后,再移至-196℃液氮罐。
復(fù)蘇方式:
1、從冰箱取出凍存細(xì)胞管,立即放入37℃水浴槽中快速解凍。
2、待凍存的細(xì)胞懸液完全融化后,立即加入1 ml細(xì)胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞混合,再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有9 ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的試管中,混合均勻。
3、離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,4℃,3~5 min),移去上清液。
4、清洗細(xì)胞,充分洗凈殘留凍存液。
5、加入適量新鮮培養(yǎng)基,使用移液管緩緩地均勻細(xì)胞混合液。適量地稀釋后,將細(xì)胞混合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)瓶中。
6、鏡檢后,研究者可根據(jù)各自方法和需要來進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。
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